產(chǎn)品名稱:AB-PAS染色試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):G1285
產(chǎn)品特點(diǎn):AB-PAS染色試劑盒PAS 技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。
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AB-PAS染色試劑盒
貨號(hào):G1285
有效期:6 個(gè)月有效。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在 1946 年使用 PAS 技術(shù)顯示黏蛋白,
該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸
性物質(zhì)。
阿利新藍(lán)和 PAS 技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術(shù)也
常用作廣泛檢測(cè)黏蛋白的手段。該技術(shù)染色陰性,可明確斷定該物質(zhì)不是黏蛋白。在大多數(shù)方法中,
切片先經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)的阿利新藍(lán)(pH 值為 2.5)染色,在使用 PAS 技術(shù)。阿利新藍(lán)可將唾液黏蛋白、硫黏
蛋白和蛋白多糖染成藍(lán)色。PAS 技術(shù)可將中性黏蛋白染成深紅/紅紫色,同時(shí)將既含中性黏蛋白有含
酸性黏蛋白的組織和細(xì)胞染成深淺不同的紫色,這是有于阿利新藍(lán)與 Schiff 試劑結(jié)合并反應(yīng)。上述
染色??沙霈F(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細(xì)胞中。
阿利新藍(lán)是類銅鈦花青染料,這種陽離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿利新藍(lán)與組織內(nèi)含有的
陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏蛋白多糖物質(zhì)中帶
負(fù)電荷的酸性基團(tuán)結(jié)合形成不溶性的復(fù)合物而呈藍(lán)色,再于 PAS 進(jìn)行復(fù)合染色,就能顯示三種不同
黏液物質(zhì)成分。
自備材料:
1、蒸餾水
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考)
1、脫蠟水,蒸餾水水洗 2min。
名稱 編號(hào) 6×50ml 6×100ml Storage
試劑(A)阿利新藍(lán)染色液 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(B)氧化劑 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(C)Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(D)蘇木素染色液 50ml 100ml 4℃ 避光
試劑(E)酸性分化液 50ml 100ml RT
試劑(F)Scott 藍(lán)化液 50ml 100ml RT
2、阿利新藍(lán)染色液染色 10-20min。
3、蒸餾水洗 3 次,每次 1-2min。
4、放入氧化劑中進(jìn)行氧化 5min。
5、Schiff Reagent 浸染 10-20min。
6、傾去 Schiff Reagent,流水沖洗 10min。
7、蘇木素染色液染核 1-2min,水洗。
8、用酸性分化液分化 2-5s,水洗。
9、用 Scott 藍(lán)化液返藍(lán),水洗 3min。
10、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白——紫紅色
酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)——藍(lán)色
蛋白多糖和透明質(zhì)酸——藍(lán)色
備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細(xì)胞或組織可染成不同程度的藍(lán)紫色紫色。
注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。
2、氧化劑氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以 18-22℃。
3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)應(yīng)置于 4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣。使用前,提前 30min 取出恢復(fù)到室溫后,避光暗處使用。
4、酸性分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。
5、切片在氧化劑和 Schiff Reagent 中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。
6、如用蘇木素染色液復(fù)染細(xì)胞核時(shí)一定要淡染,以免影響陽性物質(zhì)觀察,目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍(lán)的顏色。
7、研究表明,阿利新藍(lán)-PAS 聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響終結(jié)果。PAS 技術(shù)在阿利新藍(lán)染色之前時(shí),中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿爾辛藍(lán)染色在 PAS 技術(shù)之前時(shí),則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紫紅色。
8、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo,Cai Li,Chunxiao Yang,Bing Li,Jie Wei,Yajun Lin,Peng Ye,Gang Hu,Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29693190
《Loganetin protects against rhabdomyolysis‐induced acute kidney injury by modulating the Toll‐like receptor 4 signaling pathway》 作者:Jie Li Yu‐jun Tan Ming‐zhi Wang Ying Sun Guang‐yan Li Qi‐long Wang Jing‐chun Yao Jiang Yue Zhong Liu Gui‐min Zhang Yu‐shan Ren 期刊:British Journal of Pharmacology banner 影響因子:6.81 PMID:30706443
《Effects of cholecalciferol cholesterol emulsion on renal fibrosis and aquaporin 2 and 4 in mice with unilateral ureteral obstruction》 作者:N Liu, Y Zhang, H Su, J Wang, Z Liu, J Kong 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.457 PMID:29602131
AB-PAS染色試劑盒
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