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產(chǎn)品名稱:Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):D1850-50

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒
使用前請(qǐng)根據(jù)使用量準(zhǔn)備一些新的容器,將10×紅細(xì)胞裂解液用雙蒸水稀釋成1×的即用型紅細(xì)胞裂解液(可一次性稀釋完,也可以分次稀釋,一般稀釋后的紅細(xì)胞裂解液可保存半年以上)。

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D1850-50Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒的詳細(xì)資料:

貨號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格價(jià)格
D1850-50全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)50ml360.00
D1850-200全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)200ml960.00

Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒
使用前請(qǐng)根據(jù)使用量準(zhǔn)備一些新的容器,將10×紅細(xì)胞裂解液用雙蒸水稀釋成1×的即用型紅細(xì)胞裂解液(可一次性稀釋完,也可以分次稀釋,一般稀釋后的紅細(xì)胞裂解液可保存半年以上)。
使用說(shuō)明:
自備試劑:異丙醇,75%乙醇
處理血液量 1ml 5ml 10ml
紅細(xì)胞裂解液(1×) 5ml 25ml 50ml
白細(xì)胞裂解液 0.5ml 2.5ml 5ml
蛋白沉淀液 1ml 2.5ml 5ml
異丙醇 1ml 5ml 10ml
75%乙醇 1ml 5ml 10ml
DNA溶解液 100ul 0.5ml 1ml
1、 樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的血液樣品):在血液樣品中加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液(請(qǐng)確認(rèn)已經(jīng)稀釋過(guò)),充分顛倒混勻,12000rpm離心1min(如為大量提取并且為大離心機(jī),可11000轉(zhuǎn)離心5min),小心吸去上清,再加入2倍體積的紅細(xì)胞裂解液,用移液器輕輕吹打沉淀,充分混勻,離心,棄上清,沉淀為白細(xì)胞。向沉淀中加500ul(以1ml全血為例)白細(xì)胞裂解液,振蕩*混勻(或者用移液器吹打)。
2、65℃水浴10-20min,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直看不見明顯細(xì)胞為止。
3、加入1倍體積蛋白沉淀液(以1ml全血為例,加入500ul),充分顛倒混勻,此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色沉淀,65℃水浴5min,12000rpm離心5min(或者11000轉(zhuǎn)離心10min),小心吸取上清(沉淀可能在上層,吸取下清),放入一干凈離心管中,如還有沉淀,可再次離心。
4、在上清中加入1倍體積(以1ml全血為例,加入1ml)的異丙醇,混勻。12000rpm離心5min(或者11000轉(zhuǎn)離心10min),此時(shí)可看到管低有少量白色沉淀。小心吸取上清,棄掉。
5、向離心管中加入75%乙醇,12000rpm離心1min(或者11000轉(zhuǎn)離心2min),輕輕棄去上清液,再次離心,用移液器吸取上清,請(qǐng)不要接觸沉淀。
6、將離心管敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將離心管中殘余的乙醇去除,否則乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。
7、向離心管中加入100-300ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的DNA溶解液,室溫放置讓DNA自然溶解。如果DNA難于溶解,可室溫放置。
8、DNA電泳檢測(cè)。

Solarbio-全血基因組DNA提取試劑盒
注意事項(xiàng):
1. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA段較小且提取量也下降。
2. 若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響提取效果。
3. DNA濃度及純度檢測(cè):得到的基因組DNA段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)?;厥盏玫降腄NA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰, OD260值為1相當(dāng)于大約 50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。


相關(guān)產(chǎn)品:
D1800 全血基因組DNA提取試劑盒
E1020 EB染色液
D1010 6×DNA Loading Buffer
T1060 50×TAE 緩沖液
T1050 5×TBE 緩沖液
M1060 D2000 DNA Ladder
M1400 1kb DNA Ladder
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