產(chǎn)品名稱: 游離膽固醇(FC)含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Free Cholestenone(FC) Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC1890          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：240
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡(jiǎn)要介紹：
FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。 
    FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2，過(guò)氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。 

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：無(wú)水乙醇50mL（自備），常溫保存；
工作液：液體50mL×1瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支，10mg膽固醇，4℃保存。臨用前加入517μL無(wú)水乙醇，振蕩溶解，即為50μmol/mL的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，再將其稀釋為1μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品，待測(cè)。

產(chǎn)品說(shuō)明：
    FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。 測(cè)定原理： FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H₂O₂，過(guò)氧化物酶催化H₂O₂、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。 

自備儀器和用品：
水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、無(wú)水乙醇和蒸餾水。 

操作步驟：
一、樣品中FC提取：

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲2秒，間隔3秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血清（漿）樣品：直接測(cè)定

• 測(cè)定：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 按需取出一定量的工作液，并在37℃水浴中預(yù)熱30min，其余的4℃保存。
3. 在1.5mL離心管中加入下列試劑：

混勻后，室溫靜置15min后于500nm下測(cè)得吸光度，記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測(cè)定管；空白管和標(biāo)準(zhǔn)管分別只需做1-2個(gè)。

三、FC含量計(jì)算：

1. 血清（漿）中FC含量計(jì)算： 

FC含量（μmol/dL）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）×100mL
=100×（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）
    C標(biāo)準(zhǔn)液：1μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。 

2. 組織中FC含量計(jì)算： 

1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算 

FC含量（μmol/mg prot）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷Cpr
=（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷Cpr

2. 按樣本鮮重計(jì)算 

FC含量（μmol/g 鮮重）= C標(biāo)準(zhǔn)液×（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）×V樣總÷W
=（A測(cè)定管-A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）÷W
    C標(biāo)準(zhǔn)液：1μmol/mL；V樣總：加入提取液的體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中FC含量計(jì)算：

FC含量(μmol/10⁴cell)=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(10⁴ cell/mL)
= (A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(10⁴cell/mL)
    C標(biāo)準(zhǔn)液：1μmol/mL。
注：檢測(cè)下限：0.25μmol/mL



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游離膽固醇(FC)含量檢測(cè)試劑盒