谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱(chēng):：谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Glutamic-pyruvic Transaminase（GPT）Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC1550              產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣           產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：130
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: ：  谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)試劑盒|GPT檢測(cè)試劑盒|谷丙轉(zhuǎn)氨酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞GPT 活性很高，當(dāng)肝細(xì)胞壞死，GPT 釋放到血液中，血清GPT 活性顯著增高。因此，GPT 被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測(cè)指標(biāo)。
    GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙tong酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm 讀取吸光值并計(jì)算酶活力。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：30mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體8mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體8 mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體80mL×1瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，20μmol/mL丙tong酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞GPT活性很高，當(dāng)肝細(xì)胞壞死，GPT釋放到血液中，血清GPT活性顯著增高。因此，GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測(cè)指標(biāo)。
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙tong酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計(jì)算酶活力。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備
1、細(xì)胞或微生物樣品的制備：
先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬(wàn)細(xì)胞或微生物加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織：
稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g  4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
3、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
二、測(cè)定操作表：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)505nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定

先將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋2μmol/mL，按下表混合標(biāo)準(zhǔn)品和試劑一得到濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)管：
 

1. 在EP管中加入下列試劑

注:0μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)管為空白管。
三、計(jì)算

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸，以?A（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）為y軸做標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到方程y=kx+b。將（A測(cè)定管-A對(duì)照管）帶入方程求x值。

1. GPT活性計(jì)算：

（1）按樣本鮮重計(jì)算：
單位定義：每小時(shí)每g鮮重樣品催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個(gè)GPT活力單位。
GPT（U/g鮮重）=x×（V樣本+V試劑一）÷（W×V樣本÷V樣總）÷T=12x÷W。
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位定義：每小時(shí)每mg組織蛋白催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個(gè)GPT活力單位。
GPT（U/mg prot）=x×（V樣本+V試劑一）÷（Cpr×V樣本）÷T=12x÷Cpr。
（2）按血清體積計(jì)算：
單位定義：每小時(shí)每mL血清樣品催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個(gè)GPT活力單位。
GPT（U/mL）=x×（V樣本+V試劑一）÷V樣本÷T=12x。
V樣本：樣本體積，0.02mL；V試劑一：試劑一體積，0.1mL；V樣總：提取液體積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；T：反應(yīng)時(shí)間，0.5h。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影響因子:5.646 PMID:30373678