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產(chǎn)品名稱:β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC2560

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化β-糖苷鍵水解,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,釋放HCN,從而防止昆蟲(chóng)取食。

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BC2560β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒

 

產(chǎn)品名稱: β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: β-glucosidase(β-GC) Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào):BC2560               產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣             產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:650
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: β-葡萄糖苷酶檢測(cè)試劑盒|β-GC檢測(cè)試劑盒|β-葡萄糖苷酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹:
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化β-糖苷鍵水解,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,釋放HCN,從而防止昆蟲(chóng)取食。
β-GC分解對(duì)-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚,后者在400nm有大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GC活性。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50ml×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×2瓶,-20保存;臨用前每瓶加入10ml雙蒸水,充分溶解備用;用不完的試劑仍-20保存。
試劑二:液體25ml×1瓶,4保存。
試劑三:液體80ml×1瓶,4保存。  
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1ml×1支,取1.5ml EP管加入1ml,5μmol/ml的對(duì)硝基ben酚溶液。


產(chǎn)品說(shuō)明
β-GC(EC 3.2.1.21)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化β-糖苷鍵水解,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味;β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,釋放HCN,從而防止昆蟲(chóng)取食。
β-GC分解對(duì)-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚,后者在400nm有大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GC活性。

需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品的前處理:   

  1. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);15000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
  2. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備:取100μL標(biāo)準(zhǔn)液,加入到400μL試劑三中,得到1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)液,十倍稀釋到100nmol/ml,倍比稀釋:50、25、12.5、6.25nmol/ml,稀釋液用試劑二。100、50、25、12.5、6.25nmol/ml做標(biāo)準(zhǔn)液。
二、測(cè)定步驟:

  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)400nm,蒸餾水調(diào)零。
  2. 加樣表

 

試劑名稱(μl)對(duì)照管測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管
試劑一 400 
試劑二500500 
樣本100100 
迅速混勻,放入37準(zhǔn)確水浴30min后,立即放入沸水浴中煮沸5min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
試劑一400  
充分混勻,8000g,4,離心5min,取上清液
 
上清液500500 
標(biāo)準(zhǔn)液  500
試劑三100010001000
充分混勻,室溫靜置2min后,用對(duì)照管調(diào)零,400nm處測(cè)定吸光值A(chǔ),計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

β- GC 活力單位的計(jì)算: 
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y)和吸光度(x),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA(x)帶入公式計(jì)算樣品產(chǎn)物濃度(nmol/ml)。
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/mg prot)=(y×V反總)÷(V樣×Cpr)÷T=20×y÷Cpr
需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/g鮮重) = (y×V反總)÷(W×V樣÷V樣總)÷T=20×y÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/104 cell)=(y×V反總)÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.04×y
Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;V反總:反應(yīng)體系總體積,1ml;V樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1ml;V樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣品質(zhì)量,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬(wàn);T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h。

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