產品名稱:IPTG 溶液 (50mg/ml)
產品型號:I1020
產品特點:IPTG 溶液 (50mg/ml)貨號 :I1020規(guī)格 :5mL保存 :-20℃避光保存儲存,有效期少 12 個月。產品說明 :IPTG 為安慰性誘導物,X-gal 為生色底物,二者共同用于藍白斑篩選。IPTG 可誘導載體 Lac 操縱子 DNA 區(qū)段合成 β-半乳糖苷酶氨基端片段, 該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型 β-半乳糖苷酶實現基因內互補(α 互補)
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IPTG 溶液 (50mg/ml)
貨號 :I1020
規(guī)格 :5mL
保存 :-20℃避光保存儲存,有效期少 12 個月。
產品說明 :
IPTG 為安慰性誘導物,X-gal 為生色底物,二者共同用于藍白斑篩選。IPTG 可誘導載體 Lac 操縱子 DNA 區(qū)段合成 β-半乳糖苷酶氨基端片段, 該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型 β-半乳糖苷酶實現基因內互補(α 互補)。 實現α 互補的細菌鋪在含有 X-gal 生色底物的培養(yǎng)基上,可形成藍色菌落。外源 DNA 插入質粒的多克隆位點后可破壞α 互補作用,將產生白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重組蛋白表達的誘導劑。
此產品為 IPTG 用雙蒸水溶解過濾后配成的無菌溶液。
使用說明 :
蛋白表達誘導 :50mg/mL 濃度為 210mM。如果終濃度要求為 0.5mM,則每升培養(yǎng)基中加入 2.38mL IPTG 溶液 (50mg/mL) 。如果實驗中需要使用其他誘導濃度,可自行計算加入量。
藍白斑篩選 :
(1)在 100mL 的瓊脂培養(yǎng)基中,加入 500μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL) 、250μL 的 IPTG 溶液(50mg/mL)和 100 μL 的 Amp(氨芐青霉素,100 mg/mL) ,制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 平板培養(yǎng)基。高壓滅菌后的培養(yǎng)基需冷卻 55℃以下時加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。
(2)實際上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培養(yǎng)基表面, 90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂 40μL,IPTG(50mg/mL)涂 16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液體干后就可以使用。細菌鋪板后,37℃培養(yǎng),可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色菌落為具有 DNA 插入片段的基因重組體)。
注意事項 :
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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