Fluo-3 AM是常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。
Fluo-3和Fura-2相比，其優(yōu)點(diǎn)是：一方面可以被氬離子激光(argon-ion laser)的488nm激發(fā)光激
發(fā)，便于檢測(cè)；另一方面，F(xiàn)luo-3和鈣離子結(jié)合后熒光變化更強(qiáng)，即對(duì)鈣離子濃度變化的檢測(cè)更加靈敏；同時(shí)，F(xiàn)luo-3和鈣離子的結(jié)合能力較弱，這樣可以比Fura-2檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)更高濃度的鈣離子水平；此外，對(duì)于細(xì)胞內(nèi)的鈣離子的即時(shí)變化反應(yīng)得更加準(zhǔn)確，減小了因?yàn)楹外}離子解離速度慢而導(dǎo)致的熒光變化滯后。
本Fluo-3 AM (鈣離子熒光探針) 是配制于無(wú)水DMSO (anhydrous DMSO)中的儲(chǔ)存液，濃度為5mM。
Fluo-3 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM的熒光非常弱，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度
升高而增強(qiáng)。Fluo-3 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)為525-530nm。 |
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